SuperStar TaqMan Mixture（With ROX）

專用于探針法（TaqMan， Molecular Beacon 等）實時熒光定量 PCR 的預混體系，濃度為 2×，包含 SuperStar Taq DNA Poly-merase、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+和 ROX染料， 操作簡單方便。主要用于基因組 DNA 靶序列和 RNA反轉錄后 cDNA靶序列 檢測，如基因表達分析，拷貝數(shù)分析，SNP 基因型分析等，適用于不同類型 探針法熒光定量。本品含有的SuperStar Taq DNA Polymerase是一種經(jīng)化學修 飾的、全新高效熱啟動酶，在常溫下沒有聚合酶活性，有效避免在常溫條件下由引物和模板非特異性結合或引物二聚體而產(chǎn)生的非特異性擴增，酶的激 活須在 95℃下孵育 10 分鐘。該 PCR 緩沖體系與熱啟動酶的組合，顯著 提高了 PCR 的擴增效率，熒光信號更強，靈敏度更高，可以檢測單拷貝的模 板。使用本產(chǎn)品可以得到更廣的線性范圍，對目的基因定量更準確。所含的 ROX 染料可校正定量 PCR 儀孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號誤差，適用于以 ROX 作為校正染料的所有熒光定量 PCR 儀。

注意事項1. 使用前請上下顛倒輕輕混勻，盡量避免起泡，并經(jīng)短暫離心后使用。2. 本產(chǎn)品中含有 ROX 染料，保存本產(chǎn)品或配制 PCR 反應液時應避免強光照射。3. 避免反復凍融本品，反復凍融可能使產(chǎn)品性能下降。本產(chǎn)品長期保存可置于-20℃，避光。如果在短期內(nèi)需要頻繁使用，可在 2-8℃保存。使用方法以下舉例為常規(guī) PCR 反應體系和反應條件，實際操作中應根據(jù)模板、引物結構和目的片段大小不同進行相應的改進和優(yōu)化。1. PCR 反應體系(以 50ul 反應體系為例)

注意：1）通常引物濃度以 0.2uM 可以得到較好結果，可以在 0.1-1.0uM 作為設定范圍的參考。2）使用的探針濃度，與使用的熒光定量 PCR 儀、探針種類、熒光標記物質(zhì)種類有關，實際使用時請參照儀器說明書，或各熒光探針的具體使用要求進行濃度的調(diào)節(jié)。3）通常 DNA 模板的量以 10-100ng 基因組 DNA 或 1-10ng cDNA 為參照，因不同物種的模板中含有的目的基因拷貝數(shù)不同，可對模板進行梯度稀釋，以確定最佳的模板使用量。2. PCR反應程序注意！本產(chǎn)品預變性反應必須在 95℃ 10 分鐘下完成！兩步法 PCR：

注意：1）本產(chǎn)品所采用的熱啟動酶須在預變性 95℃、10 min 條件下實現(xiàn)酶的活化。2）建議采用兩步法 PCR 反應程序，若因使用 Tm 值較低的引物等原因，得不到良好的實驗結果時，可嘗試進行三步法 PCR 擴增，退火溫度請以56℃-64℃的范圍作為設定參考。

特點:高效 熱啟動適用范圍:熒光定量 PCR保存條件：-20℃避光保存

本產(chǎn)品僅供科研使用，請勿用于臨床診斷及其他用途

上海牧榮生物科技有限公司

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SuperStar TaqMan Mixture（With ROX）